唾液DNA提取试剂盒

产品货号：

ALH178

中文名称：

唾液DNA提取试剂盒

英文名称：

Saliva DNA extraction Kit

产品规格：

10T|50T

发货周期：

1～3天

产品价格：

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本试剂盒用于唾液样本的收集、保存、运输及DNA纯化。可提供无疼痛、非侵入性的方法，受测者不用忍受抽血的疼痛和感染的风险就能获得高质量、高数量的样品，受测者排斥性低。收集过程十分简单，受测者将唾液吐至保存液内混匀就完成收集过程。混匀后常温下可运输保存长达一年不会变质。能够节省运送、保存冷藏设备和电力费用。收集的唾液通过几个简单步骤便可提取DNA。抽取的DNA产量平均达110μg/2mL唾液。

传统的人类基因组DNA样品的采集往往需要抽血采集并提取全血基因组DNA获得。该方法有几个明显的缺点：
① 需要一定的采血设备并需要具有医务知识的人员来完成；
② 抽血的疼痛造成排斥拒绝采样；
③ 侵入性采集增加了感染的可能性；
④ 采集后血液样品必须低温运输保存。

产品特点

非侵入性采检方式免除了抽血的疼痛和降低了污染风险，并增加了取检的便利性，可由受检者自行取样。
仅需2mL的唾液样本，即可取得约110μg的DNA(不同个体产量差异很大)。
采样后的检体可稳定地储存于室温环境一年以上。

组分	10T	50T
保存液	2mL×10	2mL×50
细胞裂解液	10mL	50mL
杂质沉淀液	17mL	85mL
DNA溶解液	10mL	20mL
5mL采集管	10个	50个

保存：室温，有效期1年。

储存事项

细胞裂解液低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

一、唾液样品收集步骤：

用清水漱口1～2次，然后吐掉。
漱口后等候至少5分钟方可采集唾液，期间不要进食、饮用各种饮料。
将唾液(不是喉咙中痰液)吐到5mL采集管中，直至2mL刻度位置。
- 不可将痰液吐到收集管中，若唾液不足，可做口舌运动，促进分泌。浮在唾液上层的少量泡沫不包括计算在2mL唾液采集量内，采集过程必须在30分钟内完成。
将等体积2mL保存液全部倒在5mL唾液采集管中，充分颠倒混匀后旋紧盖子。

二、唾液DNA提取步骤
本方法以2mL唾液量举例，可按比例放大缩小每次提取的唾液量。

细胞裂解
1. 将保存液/唾液混合物放置于50℃水浴中至少1小时或50℃空气孵箱至少2小时。
2. 转移4mL混合物(2mL唾液加2mL保存液)到一个15mL或者50mL的离心管。
3. 加入1mL裂解液和10μL RNase A溶液(10mg/mL).高速涡旋振荡10秒后室温放置10分钟。
杂质沉淀
1. 加入1.7mL杂质沉淀液到上述裂解混合物中。
2. 高速涡旋振荡25秒，充分混匀杂质沉淀液和裂解混合物。
3. 2500×g离心5分钟。沉淀的杂质和蛋白会在管底形成一个致密的沉淀团。如果蛋白沉淀不太致密，可以冰上放置5分钟，然后重复步骤6。
DNA沉淀
1. 仔细转移上清(含有DNA)到一个新的15mL或者50mL的离心管。注意不要触动管底沉淀。加入5mL异丙醇。
  - 唾液DNA含量较低时，加入40μL Glycogen 20mg/mL可能提高一些产量。
2. 轻柔颠倒混匀50次。
3. 2000×g离心3分钟，此时一般可在管底看到白色的DNA沉淀。
4. 倒弃上清，倒置后在吸水纸上轻敲几下以尽可能吸干。加入5mL 70％乙醇，颠倒几次漂洗DNA沉淀。
5. 2000×g离心1分钟，仔细倒去上清。
  - 沉淀很松，注意不要把DNA沉淀倒掉了。
6. 倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇，还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇，空气晾干沉淀几分钟(不要干过头，也不要残留乙醇)。
DNA溶解水化
1. 加入250μL～400μL DNA溶解液重新水化溶解DNA沉淀，轻弹管壁混匀。
2. 可以放置在65℃温育30～60分钟(不要超过一小时)，然后在室温或者4℃放置过夜来重新水化DNA，中间不时的轻弹管壁帮助重新水化DNA。
3. DNA可以存放在2～8℃，如果要长时间存放，可以放置在-20℃或者-80℃。

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